使用指南 | User Guide
基本说明 | Basic Description
安捷伦流量计算器用于色谱分析中计算和优化流动相参数、评估柱效率和分离性能。通过输入色谱柱参数和分析条件,可以获得重要的色谱性能指标。
参数说明 | Parameter Description
柱长 (L):色谱柱的长度,单位为毫米(mm)
内径 (ID):色谱柱的内径,单位为毫米(mm)
粒径 (dp):填料颗粒的直径,单位为微米(μm)
流速 (F):流动相的体积流速,单位为毫升每分钟(mL/min)
保留时间 (tᵣ):分析物从进样到检测的时间,单位为分钟(min)
峰宽 (w):色谱峰在基线处的宽度,单位为分钟(min)
结果说明 | Results Explanation
线性流速 (u):流动相在色谱柱中的线性速度,单位为厘米每秒(cm/s)
空柱时间 (t₀):不被色谱柱保留的物质通过色谱柱所需的时间,单位为分钟(min)
容量因子 (k'):描述分析物在固定相和流动相之间分配的比例,无量纲
理论塔板数 (N):评估色谱柱分离效率的指标,无量纲
塔板高度 (HETP):单个理论塔板的高度,单位为微米(μm)
柱效率 (N/m):单位长度色谱柱的理论塔板数,单位为每米塔板数(N/m)
公式说明 | Formula Explanation
线性流速计算:
u = L / (t₀ × 60)
其中:
u - 线性流速 (cm/s)
L - 柱长 (cm)
t₀ - 空柱时间 (min)
60 - 转换系数(分钟到秒)
空柱时间计算:
t₀ = Vₘ / F
其中:
t₀ - 空柱时间 (min)
Vₘ - 柱空隙体积 (mL)
F - 流速 (mL/min)
理论塔板数计算:
N = 16 × (tᵣ / w)²
其中:
N - 理论塔板数
tᵣ - 保留时间 (min)
w - 峰宽 (min)
应用示例 | Application Example
问题:
使用C18色谱柱(150 mm × 4.6 mm, 5 μm)进行分析,流速为1.0 mL/min,某化合物的保留时间为5.2分钟,峰宽为0.25分钟。计算色谱柱的效率。
解决步骤:
计算理论塔板数:
N = 16 × (5.2/0.25)² = 16 × 432.64 = 6922
计算塔板高度:
HETP = 150 mm / 6922 = 0.0217 mm = 21.7 μm
计算柱效率:
柱效率 = 6922 / 0.15 m = 46147 N/m
优化建议 | Optimization Tips
理想的容量因子(k')范围为1-10,小于1表示保留不足,大于10表示分析时间过长
提高理论塔板数可以通过减小粒径、增加柱长或优化流速来实现
HPLC分析的最佳线性流速通常在0.1-0.5 cm/s范围内
对于复杂样品,理论塔板数至少应达到5000以上才能获得良好的分离
减小粒径可以显著提高柱效率,但会增加柱压